Наша реклама

Поиск

Hydroxocobalaminum

Posted 7/8/2009 в 2:24:32 ДП

ГИДРОКСОКОБАЛАМИН
Гидроксокобаламин безводный Гидроксокобаламина гидрат
Молекулярная формула. C62H89C0N13O15P (безводный); C62H89C0N13O15P-H2O (моногидрат).
Относительная молекулярная масса. 1346 (безводный); 1365 (моногидрат).
Структурная формула (см. стр. 175).
Химическое наименование. Кобинамида дигидроксид дигидро-фосфат (эфир), моно(внутренняя соль), З'-эфир с 5,6-диметил-l-a-n-рибофуранозилбензимидазолом; кобинамида дигидрофос-фат (эфир)-моно (внутренняя соль, З'-эфир с 5,6-диметил-1а-1>-рибофуранозилом-1Я-бензимидазолом; Coa-fa-(5,6-диметилбенз-имидазолил)]-Ссф-гидрокосокобамид; per. № CAS 13422-51-0 (безводный). Кобинамида дигидроксид моногидрат, дигидро-фосфата (эфир), моно(внутренняя соль), З'-эфир с 5,6-диме-тил-1-а-Б-рибофуранозилбензимидазолом; кобинамида дигидроксида моногидрат, дигидрофосфата (эфир), моно (внутренняя соль) З'-эфир с 5,6-диметил-1-а-и-рибофуранозил-1//-бензими-дазолом-Coa- [а- (5,6-диметилбензимидазолил) ] -Ссф-гидроксоко-бамида моногидрат; per. № CAS 13422-52-1 (моногидрат).
Синонимы. Витамин Bi2a для безводного гидроксокобаламина и витамин Bi2 для гидроксокобаламина гидрата.
Описание. Темно-красные кристаллы или красный кристаллический порошок без запаха.
Растворимость. Умеренно растворим в воде и этаноле (~750 г/л) ИР; практически нерастворим в ацетоне Р и хлороформе Р.
Категория. Средство для лечения анемии.
Хранение. Гидроксокобаламин следует хранить в плотно укупоренной таре, предохраняющей от действия света, в прохладном месте.
Указание на этикетке. На этикетке должно быть указано, является ли вещество безводной формой или гидратом.
Дополнительная информация. В водных растворах гидроксокобаламин существует в виде гидроксокобамида, находящегося в равновесии с гидратированной ионной формой. Безводная форма гидроксокобаламина очень гигроскопична. Даже в темноте он постепенно разлагается во влажной атмосфере, причем разрушение ускоряется при повышении температуры.
ТРЕБОВАНИЯ
Общее требование. Гидроксокобаламин содержит не менее 96,0 и не более 102,0% C62H89CoNi3Oi5P в пересчете на высушенное вещество.
Подлинность
A. Спектр поглощения раствора испытуемого вещества в ацетатном буфере ИР с рН 4,5 и концентрацией 40 мкг/мл при наблюдении между 230 и 550 нм дает 3 максимума при длинах волн около 274, 351 и 525 нм; отношение поглощения слоя в 1 см при 525 нм к таковому при 351 нм около 0,34, а отношение поглощения при 274 нм к таковому при 351 нм около 0,80.
Б. Осторожно нагревают около 2 мг испытуемого вещества в фарфоровом тигле с несколькими каплями серной кислоты (~1760 г/л) ИР, пока не образуется синеватый остаток. Охлаждают, добавляют 0,05 мл воды и затем несколько капель насыщенного раствора аммония тиоцианата Р; появляется сине-зеленое окрашивание.
B. Помещают около 2 мг испытуемого вещества в колбу объемом 100 мл с притертой пробкой, растворяют в 2 мл воды и добавляют 5 мл фосфорной кислоты (~1440 г/л) ИР. Ставят в колбу стеклянную пробирку с плоским дном диаметром 1 см и высотой 2 см, содержащую 1 мл раствора карбоната лития в тринитрофеноле ИР. Закрывают колбу и выставляют ее на 4 ч на яркий свет; цвет реагента в стеклянной пробирке не изменяется (в отличие от цианокобаламина).
Потеря при высушивании. Высушивают гидроксокобаламина гидрат при 100°С при пониженном давлении (не выше 0,6кПа или около 5 мм рт. ст.) в течение 2 ч; потеря составляет 140— 180 мг/г.
рН раствора. рН раствора испытуемого вещества в свободной от диоксида углерода воде Р с концентрацией 20 мг/мл равняется 8,0—10,0.
Другие кобаламины. Проводят испытание, как описано в разделе «Хроматография на колонках» (т. 1, с. 100), встряхивая 20 г диэтиламиноэтилцеллюлозы Р с 200 мл раствора гидрокси-да натрия (0,5 моль/л) ТР, разводят водой для получения гомогенной суспензии, дают ей осесть и отбрасывают надосадоч-ную жидкость. Используя подходящий фильтр, промывают водой, пока промывные воды не будут свободны от щелочи, затем переносят сорбент в трубку высотой 22 см и диаметром 1,2 см, снабженную запорным краном. Дают осесть и спускают
жидкость, пока сорбент не опустится до 14 см. Промывают водой, пока рН элюата не сравняется с рН воды.
Аналогичным образом заполняют вторую колонку, готовят суспензию карбоксиметилцеллюлозы Р в соляной кислоте (0,5 моль/л) ТР, разводят водой, дают осесть и удаляют над-осадочную жидкость. Используя подходящий фильтр, промывают водой, пока промывные воды не освободятся от кислоты, затем переносят сорбент в трубку высотой 22 см и диаметром 1,2 см, снабженную запорным краном. Дают осесть и спускают жидкость, пока рН элюата не сравняется с рН воды.
Закрывают каждую колонку пробкой из стекловаты и сливают жидкость, пока сорбенты не будут покрыты лишь тонким слоем воды.
Помещают колонку с диэтиламиноэтилцеллюлозой над другой колонкой так, чтобы элюент попадал в карбоксиметилцел-люлозу.
Точно взвешивают около 0,05 г испытуемого вещества, растворяют его в 20 мл воды, подкисляют количеством соляной кислоты (~70 г/л) ИР, достаточным для получения рН 4,0. Наносят раствор на колонку с диэтиламиноэтилцеллюлозой и дают ему протечь через обе колонки, отбрасывая первый бесцветный элюат. Элюируют водой, рН которой предварительно был доведен до 4,0 соляной кислотой (—70 г/л) ИР. Собирают окрашенный элюат в мерную колбу объемом 50 мл и доводят до указанного объема водой. Измеряют поглощение этого раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме около 361 нм и рассчитывают содержание других кобаламинов в мг/г, используя коэффициент поглощения 20,7 (Л)"^ =207); не более 30 мг/г.
Кислотные примеси. Промывают колонку с диэтиламиноэтилцеллюлозой, приготовленную для вышеописанного испытания на другие кобаламины, раствором хлорида натрия (10 г/л) ИР, собирая 50 мл элюата. Измеряют поглощение этого раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме между 351 и 361 нм и рассчитывают содержание кислотных примесей в мг/г, используя коэффициент поглощения 19,0 (Л{%м = 190); не более 30 мг/г.
Количественное определение
• Растворы необходимо защищать от действия света в течение всего испытания.
Растворяют около 20 мг испытуемого вещества (точная навеска) в количестве ацетатного буфера рН 4,5 ИР, достаточном для получения 500 мл. Измеряют поглощение этого раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме около 351 нм и рассчитывают содержание СегНвэСоГЧ^О^Р, используя коэффициент поглощения 19,5 (Л\%м =195).

Posted on at 2:24 In H | Комментарии RSS