Наша реклама

Поиск

Bleomycini sulfas

Posted 1/3/2010 в 12:14:40 ПП

БЛЕОМИЦИНА СУЛЬФАТ
Блеомицина сульфат (не для инъекций) Блеомицина сульфат стерильный
Состав. Блеомицина сульфат —это сульфатная соль смеси веществ, продуцируемых при росте Streptomyces verticillus. Основными компонентами смеси являются блеомицин А2 и блеомицин В2; per. № С AS 9041-93-4.
Молекулярная формула. Блеомицина А2 сульфат: C55H84N17021S3--HSCy, Блеомицина В2 сульфат: C55H84N2o021S2-H2S04.
Относительная молекулярная масса. Блеомицина А2 сульфат: 1514; Блеомицина В2 сульфат: 1524.
Структурные формулы оснований блеомицина А2/В2.
Химическое наименование: Блеомицина А2 сульфат: Л^-[3-(диме-тилсульфонио) пропил] блеомицинамида бисульфат- ГЗ-12'-Г2-[(2S,3/?)-2-[(2S,3S,4/?)-4-[(2S,3/?)-2-[6-aMHHo-2-f(lS)-]l-[[(2S)-
2-амино-2-карбамоилэтил]амино]-2-карбамоилэтил]-5-метил-4-пиримидинкарбоксамидо]-3-[[2-0-(3-0-карбамоил-а-п-маннопи-ранозил)-а-ь-гулопиранозпл]окси]-3-имидазол-4-илпропионами-до]-3-гидрокси-2-метилвалерамидо]-3-гидроксибутирамидо]этил] [2,4'-битиазол]-4-карбоксамидо] пропил] диметилсульфония бисульфат.
Блеомицина В2 сульфат: Л/1-(гуанидинобутил)блеомицинамид; (|3S)-4-aMiHHO-|3-[[ (25)-2-амино-2-карбамоилэтил]амино]-6-[ [ (15, 2R)-2-[ [2-0-(30-карбамоил-а-"-маннопиранозил)-а-ь - гулопира-нозил]окси]-1-[[(1/?,25,35)-3-[[(15,2/?)-1-[[2-[4-((4-гуанидино-бутил)карбамоил] [2,4'-битиазол]-2'-ил]этил]карбамоил]-2-гид-рокоипропил] карбамоил]-2-гидрокси-1-метилбутил]карбамоил]-2-имидазол-4-илэтил]карбамоил]-5-метнл-2-пиримидинпропиона-м-ида сульфат (соль);
Л^-[4-[ (аминоиминометил) амино]бутнл]блеомицинамида сульфат (соль).
Описание. Белый или кремовый аморфный порошок. Растворимость. Очень легко растворим в воде. Категория. Цитотоксичеокое средство.
Хранение. Блеомицина сульфат следует хранить в плотно укупоренной таре.
Указание на этикетке. Указание «Стерильный блеомицина сульфат» означает, что данное вещество отвечает дополнительным требованиям, предъявляемым к стерильному блеомицина сульфату, и может быть использовано для парентерального введения или других видов стерильного применения. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: с блеомицина сульфатом следует обращаться осторожно, избегая его попадания на кожу и вдыхания.
ТРЕБОВАНИЯ
Общее требование. Блеомицина сульфат при количественном определении методом А содержит не менее 1500 и не более 2000 ME блеомицина А2/В2 в 1 мг в пересчете на высушенное вещество.
Кроме того, при количественном определении методом Б, блеомицина сульфат содержит не менее 55,0 и не более 70,0% блеомицина А2 и не менее 25,0 и не более 32,0% блеомицина В2; общее количество блеомицина Аг и блеомицина Вг не менее 85%. Содержание блеомицина As не более 7,0%, блеом'ицина В4 не более 1,0% и деметилблеомицина А2 не более 3,0%.
Подлинность
А. Растворяют около 5 мг испытуемого вещества в 10 мл воды, добавляют 5 мкл раствора сульфата меди (II) (160 г/л) ИР и разводят водой до 100 мл; спектр поглощения дает максимумы
при длине волны около 242 и 290 нм и минимум примерно при 268 нм.
Б. Раствор испытуемого вещества с концентрацией 10 мг/мл дает характерную для сульфатов реакцию А, описанную в разделе «Общие испытания на подлинность» (т. 1, с. 132).
Потеря при высушивании. Высушивают 4 ч при 60 °С и пониженном давлении (не выше 0,6 кПа или 5 мм рт. ст.); потеря составляет не более 60 мг/г.
рН раствора. рН раствора испытуемого вещества с концентрацией 5,0 мг/мл составляет 4,5—6,0.
Содержание меди. Помещают 75 мг испытуемого вещества (точная навеска) в делительную воронку объемом 60 мл и растворяют в 10 мл соляной кислоты (0,1 моль/л) ТР. В другую делительную воронку помещают 10 мл раствора стандарта меди ИР2. В обе воронки добавляют по 10 мл раствора цинка бис(дибен-зилдитиокарбамата) ИР и энергично встряхивают в течение 1 мин. Дают слоям разделиться. Фильтруют нижний слой через 1 г безводного сульфата натрия Р для удаления избыточной воды. Измеряют поглощение в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме около 435 нм против контрольной кюветы, содержащей тетрахлорид углерода Р.
Рассчитывают количество меди в мг/г по формуле (Л0Х15)/ (AsxW), где А0 — поглощение испытуемого вещества, As — глощение стандарта меди ИР2 и W—масса в мг испытуемого вещества; содержание меди не более 0,2 мг/г
Количественное определение
А. Количественное определение микробиологической активности. Проводят определение, как описано в разделе «Количественное определение микробиологической активности антибиотиков» (т. 1, с 165), используя Mycobacterium smegmatis (штамм АТСС 607) в качестве тест-организма. Инокулят готовят следующим образом: тест-организм выращивают на поверхности культуральной среды Кс8 в течение 40—48 ч при температуре 27 °С. Используют 3 мл физиологического раствора ИР для смывания колоний в колбу, 'содержащую 100 мл культуральной среды Кс9 и 50 г стеклянных гранул, .и инкубируют при 25—27°С 5 дней при постоянном механическом перемешивании с помощью роллера. Полученную суспензию следует использовать в течение 14 дней и хранить при температуре ниже 5°С. Для приготовления иноку-лированных чашек используют 0,5 мл суспензии или соответствующий объем, предварительно определенный с использованием испытательных чашек с культуральной средой Кс8 при температуре 27 °С. Готовят эталонный раствор в фосфатном буфере рН 7,0 ИР, разводя Международный эталонный препарат блеомицина А2/В2 до соответствующей концентрации (обычно 10— 200 мкг в 1 мл). Точность определения такова, что фидуциаль-ные пределы ошибки для найденной активности (Р = 0,95) не менее 95 и не более 105% найденной активности. Верхний фиду-циальный предел ошибки не менее 1500 ME, а нижний фидуци-альный предел не более 2000 ME блеомицина А2/В2 в 1 мг в пересчете на высушенное вещество.
Б. Содержание компонентов блеомицина. Проводят определение, как описано в разделе «Высокоэффективная жидкостная хроматография» дополнений к т. 1, используя колонку высотой 25 см и 'внутренним диаметром 4,6 мм, заполненную частицами сили-кагеля 5—10 мкм в диаметре, поверхность которых модифицирована химически связанными октадецилсилильными группами. Линейный градиент подвижной фазы начинается смесью 9 объемов 1-лентансульфоновой кислоты ИР и 1 объема метанола Р (оба вещества предварительно фильтруют и дезаэрируют) и заканчивается смесью 6 объемов 1-пентансульфоновой кислоты ИР и 4 объемов метанола Р; подбирают такую линейную скорость изменения состава подвижной фазы, которая обеспечивает достижение окончательного состава через 60 мин. (При необходимости, для получения удовлетворительных результатов хроматографии к подвижной фазе добавляют 1,86 эдетата динатрия Р на 1 л.) В качестве детектора используют ультрафиолетовый спектрофотометр на длине волны около 254 нм, снабженный малообъемной проточной кюветой (подходит объем 8—20 мкл). Вводят 5 мкл раствора испытуемого вещества в воде с концентрацией, соответствующей 5 ME блеомицина в 1 мл. Проводят градиентную элюцию, вводя подвижную фазу при вышеописанных условиях в течение около 80 мин или пока не будет элюирован деметилблеомицин А2.
Порядок элюции компонентов блеомицина таков: свободный объем, 'блеомициновая кислота, блеомицин А2, блеомицин В2, блеомицин As, блеомицин В4 и деметилблеомицин А2.
Рассчитывают процентное содержание каждого компонента блеомицина путем сравнения площадей отдельных пиков с общей площадью пиков всех блеомицинов.
Дополнительные требования к стерильному блеомицина сульфату
Хранение. Стерильный блеомицина сульфат следует хранить в герметически укупоренной таре.
Гистаминоподобные вещества. Проводят испытание, как описано в разделе «Испытание на гистаминоподобные вещества» (т. 1, с. 179), используя на 1 кг массы 1 мл раствора в физиологиче-
ском растворе ИР, содержащего количество, соответствующее 500 ME в 1 мл.
Неспецифическая токсичность. Проводят испытание, как описано в разделе «Неспецифичеокая токсичность» (т. 1, с. 176), используя 0,5 мл раствора в физиологическом растворе ИР, содержащего количество, соответствующее 5000 ME блеомицина сульфата в 1 мл.
Пирогенность. Проводят испытание, как описано в разделе «Испытание на пирогенность» (т. 1, с. 176), вводя кролику на 1 кг массы тела 1 мл раствора в физиологическом растворе ИР, содержащего 500 ME блеомицина сульфата в 1 мл.
Стерильность. Выдерживает «Испытание антибиотиков на стерильность» (т. 1, с. 172); используют методику мембранной фильтрации.

Posted on at 12:14 In B | Комментарии RSS