Наша реклама

Поиск

Рекомендуемая методика

Posted 6/14/2009 в 6:49:36 ДП

Испытание на вазодепрессивные вещества проводится на кошках путем сравнения снижения артериального давления, вызванного испытуемым раствором, со снижением, обусловленным введением раствора гистамина. Используют здоровых взрослых кошек — самцов или небеременных самок.
Определяют массу животного и дают ему общий наркоз, вводя хлоралгидрат Р или подходящий барбитурат, поддерживающий равномерное кровяное давление. Защищают животное от охлаждения и поддерживают в таком состоянии, при котором ректальная температура остается в физиологических пределах. Вводят трубку в трахею. Хирургическим путем открывают сонную артерию и атравматично отделяют ее полностью от всех подлежащих структур, в том числе от блуждающего нерва. Вводят в артерию канюлю, заполненную гепа-ринизированным физиологическим раствором ИР, и соединяют ее с ртутным манометром или другим устройством, позволяющим постоянно регистрировать кровяное давление. Хирургически выделяют яремную или бедренную вену и вставляют вторую канюлю, которая заполнена гепаринизирован-ным физиологическим раствором ИР и через которую можно вводить растворы гистамина и испытуемого вещества.
Определяют чувствительность животного к гистамину следующим образом. Включают кимограф или подобное регистрирующее устройство и контролируют запись амплитуды колебаний и относительной устойчивости кровяного давления. Вводят в яремную или бедренную вену раствор гистамина ИР в дозах 0,05 мкг (доза А), 0,1 мкг (доза Б), повторенных не менее 3 раз, и 0,15 мкг (доза В) гистамина основания на 1 кг массы животного. Вводят вторую и последующие дозы не менее чем через 1 мин после возвращения кровяного давления к уровню, зарегистрированному сразу после предшествующего введения. Повторяют эту серию введений до тех пор, пока не будет получено для доз Б гистамина относительно равномерное снижение давления; при этом результаты первой серии введений не принимаются в расчет. Животное можно использовать для испытания только в том случае, если снижение давления, вызванное дозами Б, составляет не менее 2,7 кПа (20 мм рт. ст.) и, кроме того, если доза А вызывает меньший ответ, чем доза Б, а доза В дает больший ответ, чем доза Б.
Готовят испытуемый раствор, как описано в частной статье. Во время испытания следят за тем, чтобы скорость введения испытуемого и стандартного растворов была равномерной и одинаковой. Если растворы вводят в яремную вену, необходимо обратить внимание на то, чтобы испытуемый и стандартный растворы гистамина вводились в разных объемах во избежание влияния объема на кровяное давление. Если для стандартного и испытуемого растворов используется общая канюля, необходимо тотчас после введения каждого из растворов вводить приблизительно 2,0 мл изотонического раствора ИР для промывания трубки.
Вводят дозу Б стандартного раствора, затем указанное количество испытуемого раствора, а затем другую дозу Б стандартного раствора. Вторую и третью дозы вводят не менее чем через 1 мин после того, как кровяное давление возвратится к уровню, отмеченному непосредственно перед предшествующим введением. Если ответ на испытуемый раствор больше, чем ответ, ранее полученный на дозу А, повторяют серию введений дважды и заканчивают испытание, вводя дозу В стандартного раствора. Если ответ на дозу В не превышает ответ на дозу Б, испытание считают недействительным.
Животное можно использовать для испытаний до тех пор, пока оно остается относительно устойчивым и реагирующим на гистамин при условии, что а) введение испытуемого вещества не вызывает большего снижения, чем снижение, вызванное дозой В, и б) ответ на дозу В стандартного раствора, введенного после испытуемого вещества, йе будет ниже среднего ответа на ранее введенные дозы Б.
Вещество выдерживает испытание, если ответ или средняя величина ответов после введения количества, указанного в частной статье, меньше средней величины соответствующих ответов на дозу Б стандартного раствора (0,1 мкг гистамина основания на 1 кг массы животного) и ни одна из отдельных доз испытуемого раствора не вызывает снижения давления больше, чем доза В стандартного раствора (0,15 мкг гистамина основания на 1 кг массы животного).