Наша реклама

Поиск

Рекомендуемая методика

Posted 6/14/2009 в 5:03:42 ДП

Нисходящая хроматография на бумаге
Прибор состоит из стеклянной камеры, размеры которой должны соответствовать размерам используемой бумаги; сверху камера плотно закрывается притертой стеклянной крышкой. Крышка имеет центральное отверстие диаметром около 1,5 см, закрытое массивной стеклянной палочкой или пробкой. В верхней части камеры находится лодочка с растворителем и приспособлением, обычно в виде стеклянной палочки, для удерживания хроматографической бумаги. С обеих сторон лодочки, параллельно и несколько выше ее краев имеются две стеклянные направляющие палочки для поддержания бумаги в таком положении, при котором она совершенно не будет касаться стенок камеры. Хроматографи-ческая бумага представляет собой подходящую фильтровальную бумагу, нарезанную полосками достаточной длины и любой подходящей ширины — от 2,5 см до длины лодочки. Бумагу разрезают таким образом, чтобы подвижная фаза двигалась в направлении волокна бумаги.
Метод
На дно хроматографической камеры помещают слой подвижной фазы, указанной в статье, глубиной 2—3 см. Закрывают камеру и оставляют стоять на 24 ч при постоянной температуре. Все операции, во время которых бумага подвергается воздействию воздушной среды, должны проводиться при относительной влажности около 50%. Эти условия поддерживаются в камере в течение всего последующего опыта. На одном конце бумаги тонко отточенным карандашом проводят горизонтальную линию на таком расстоянии от края, чтобы она была на несколько сантиметров ниже направляющей палочки и параллельна ей, когда этот конец бумаги погружен в лодочку с растворителем, а оставшаяся часть свободно висит на направляющей палочке. С помощью микропипетки, шприца или другого подходящего инструмента наносят раствор, указанный в статье, на какую-либо точку на линии,
прочерченной карандашом. Если общий объем раствора, который надо нанести, дает пятно диаметром более 10 мм, раствор наносят частями, высушивая каждый раз перед нанесением следующей порции. Если на одной полоске бумаги необходимо получить несколько хроматограмм, то расстояний между точками нанесения растворов на карандашной линии должны быть не менее 3 см. Вносят бумагу в камеру, закрывают крышку и оставляют стоять на 90 мин. Затем в лодочку для растворителя через отверстие в крышке вносят в достаточном количестве подвижную фазу, указанную в статье, закрывают камеру и хроматографируют до указанного расстоя-нили или в течение определенного времени. Вынимают бумагу из хроматографической камеры и высушивают на воздухе. Во время хроматографирования и высушивания бумагу следует защищать от яркого света.
Восходящая хроматография на бумаге
Прибор состоит из стеклянной камеры, размеры которой должны соответствовать размерам используемой бумаги; сверху камера закрывается плотно притертой стеклянной крышкой. В верхней части камеры имеется приспособление, которое поддерживает хроматографическую бумагу и которое можно опустить, не открывая камеры. У основания камеры имеется чашка для подвижной фазы, в которую можно опустить бумагу. Хроматографическая бумага представляет собой •подходящую фильтровальную бумагу, нарезанную полосками достаточной длины и шириной не менее 2,5 см; бумагу разрезают таким образом, чтобы подвижная фаза двигалась в направлении волокон бумаги.
Метод
Помещают в чашку подвижную фазу, указанную в статье, слоем глубиной 2—3 см. Если в статье указано, между чапь кой и стенками камеры наливают неподвижную фазу. Закрыт вают камеру и оставляют на 24 ч три постоянной температуре. Поддерживают камеру в тех же температурных условиях в течение всего последующего опыта. Все операции, во время которых бумага подвергается действию воздушной среды, должны проводиться при относительной влажности около 50%. Проводят тонко отточенным карандашом горизонтальную линию на расстоянии 3 см от одного из концов бумаги. С помощью микропипетки, шприца или другого подходящего инструмента наносят раствор, указанный в статье, на какую-ли-. бо точку на линии, прочерченной карандашом. Если общий объем раствора, который надо нанести, дает пятно диаметром более 10 мм, его наносят частями, высушивая каждый раз перед нанесением следующей порции. Если на одной полоске бумаги необходимо получить несколько хроматограмм, то расстояния между точками нанесения растворов на карандашной линии должны быть не менее 3 см. Вносят бумагу в камеру, закрывают крышку и оставляют на 90 мин. Погружают бумагу в подвижную фазу, указанную в статье, и хроматографиру-ют до указанного расстояния или в течение определенного времени. Вынимают бумагу из хроматографической камеры и высушивают на воздухе. Во время хроматографирования и высушивания бумагу следует защищать от яркого света.