Наша реклама

Поиск

Рекомендуемая методика

Posted 6/14/2009 в 4:57:38 ДП

Методика, приведенная ниже, предполагает применение хроматографической пластинки, приготовленной в лаборатории, однако можно использовать предварительно покрытые адсорбентом готовые и, если необходимо, активированные пластинки при условии, что показана их пригодность для данного конкретного случая.
Оборудование состоит из:
— устройства для распределения на пластинке равномерного слоя покрывающего вещества желаемой толщины;
— пластинок длиной 200 мм и шириной, достаточной для нанесения требуемого количества проб испытуемого раствора и раствора стандартного образца;
— хроматографической камеры из прозрачного материала, обычно из стекла, с притертой крышкой; размеры камеры должны соответствовать размеру используемых пластинок.
Готовят суспензию покрывающего вещества и, используя приспособление для распределения сорбента, покрывают тщательно очищенные пластинки слоем около 0,25 мм толщины, если в статье нет других указаний. Дают покрытым пластинкам высохнуть на воздухе и нагревают для активации, если нет других указаний, при 110° С в течение 30 мин, затем дают охладиться. Если пластинки сразу не используют, их хранят в эксикаторе, содержащем осушитель силикагель Р. С вертикальных сторон пластинки удаляют слой сорбента шириной 2—5 мм.
Если в статье нет других указаний, работу проводят в условиях насыщенной камеры. Для достижения таких условий в камеру помещают фильтровальную бумагу и вливают такое количество подвижной фазы, которое достаточно для насыщения фильтровальной бумаги и образования слоя глубиной около 5 мм. Закрывают камеру и оставляют стоять не менее чем на 1 ч при комнатной температуре.
Метод
Все операции, во время которых пластинка подвергается воздействию воздушной среды, предпочтительно проводить при относительной влажности 50—60%. Наносят объем раствора, указанный в статье, в виде компактного пятна диаметром не более 4 мм. Для нанесения используют микропипетку, шприц или другой подходящий инструмент. Пятно должно находиться на расстоянии около 1,5 см от нижнего края и отстоять не менее чем на 2 см от вертикальной стороны пластинки. Если на одной пластинке получают несколько хро-матограмм, пятна следует располагать на расстоянии не менее 1,5 см друг от друга на линии, параллельной нижнему краю пластинки. Когда растворитель выпарится, помещают пластинку в хроматографическую камеру, стараясь установить ее как можно точнее в вертикальном положении; стартовые точки должны находиться выше уровня подвижной фазы. Закрывают камеру и выдерживают при постоянной температуре. Дают подвижной фазе подняться на предписанное расстояние, обычно на 10—15 см, вынимают пластинку, отмечают положение фронта растворителя и высушивают, как указано в соответствующей статье.