Наша реклама

Поиск

Приготовление раствора

Posted 6/14/2009 в 3:59:05 ДП

Необходимо правильно выбирать используемый для измерения растворитель. На интенсивность и спектральное распределение флуоресценции могут существенно влиять сам растворитель, его чистота и величина рН.
Концентрация испытуемых растворов для флуоресцентной спектрофотометрии обычно в 10—100 раз слабее концентрации растворов, применяемых в абсорбционной спектрофотометрии. Для аналитического применения необходимо, чтобы интенсивность флуоресценции была линейно связана с концентрацией вещества в области, используемой для измерений- однако если раствор слишком концентрированный, то значительная часть падающего света поглощается веществом у поверхности кюветы, что приводит к снижению интенсивности потока света, достигающего центра кюветы. В результате получается, что само вещество действует как «внутренний фильтр». Но поскольку флуоресцентная спектрофотометра — высокочувствительный метод, часто можно использовать растворы в концентрации порядка 10~5—10~7 моль/л.
Область, в которой флуоресценция пропорциональна концентрации флуоресцирующего вещества, обычно очень узка; поэтому соотношение (с—d)l (а—Ь), где а — интенсивность флуоресценции для стандартного вещества, b — то же для соответствующего контрольного вещества, с — интенсивность флуоресценции для испытуемого вещества и d— то же для соответствующего контрольного раствора, должно быть не менее 0,40 и не более 2,50. Поэтому необходимо построить рабочую кривую зависимости интенсивности флуоресценции с поправкой на контрольный раствор от концентрации.