Наша реклама

Поиск

Количественные определения в ультрафиолетовой области спектра

Posted 6/14/2009 в 3:48:40 ДП

Обычно проведение спектрофотометрических количественных определений требует сравнения величины поглощения, полученной для раствора испытуемого вещества, приготовленного, как указано в статье, с величиной поглощения стандартного образца. В таких случаях спектрофотометрические измерения вначале проводят с раствором стандартного образца, а затем с раствором испытуемого вещества. Второе измерение проводят как можно быстрее после первого и в тех же экспериментальных условиях.
Спектрофотометрические количественные определения обычно проводят в пике спектрального поглощения данного вещества. В статьях приводится общепринятая длина волны для пика спектрального поглощения исследуемого вещества. Известно, что различные спектрофотометры могут давать небольшие отклонения от длины волны этого пика. Практика показывает, что следует использовать длину волны пика, найденную на данном приборе, а не конкретную длину волны, приведенную в статье, при условии, что эти величины отличаются одна от другой не более чем на ±0,5 нм в области 240—280 нм, ,±1 нм в области 280—320 нм и ±2 нм в области выше 320 нм. Если разница больше, прибор следует повторно калибровать.
Раствор стандартного образца, обычно Международного химического стандартного образца, должен быть приготовлен и определен так же, как описано в разделе «Испытания на подлинность в ультрафиолетовой области спектра». Вычисления следует производить на основе точно взвешенного количества, а если стандартный образец не был предварительно высушен — в пересчете на высушенное или безводное вещество, в отдельных статьях имеются специальные указания относительно того, как должен быть высушен стандартный образец или как с ним следует поступать перед использованием. Эти указания необходимо соблюдать, если для отдельного испытания, количественного определения или на этикетке стандартного образца не приведены другие инструкции.
Для того чтобы можно было убедиться, что условия проведения испытания соответствуют установленным, в статье также может быть указана величина поглощения слоя стандартного образца толщиной 1 см. В этом случае определение, выполненное для стандартного образца, считается верным, если наблюдаемая величина поглощения находится в пределах величин, приведенных в статье.
Для количественных определений часто используют приборы с ручной разверткой длин волн. Если для этой цели применяется регистрирующий прибор, следует обратить внимание на правильность калибровки шкалы поглощения при используемой длине волны.
Количественные определения обычно проводят при длинах волн выше 235 нм. Если измерения должны выполняться в области длин волн 190—210 нм, необходимо соблюдать специальные меры предосторожности, такие, как продувание кю-ветного отделения азотом, использование растворителей специального спектрофотометрического качества и применение прозрачных в этой области кювет.
При измерении поглощения при его максимуме ширина спектральной щели должна быть меньше, чем половина полосы поглощения, иначе результаты будут ошибочно указывать на низкое поглощение. Некоторые вещества в этом отношении требуют особого внимания; во всех случаях ширина щели прибора должна быть такой, чтобы дальнейшее уменьшение щели не приводило к возрастанию величины поглощения. При ширине щели менее 0,01 мм из-за дифракции светового потока измерение может быть затруднено.
Если количественные измерения проводятся достаточно регулярно и часто, можно вместо стандартного образца использовать подходящий калибровочный график, полученный для соответствующего Международного химического стандартного образца. Таким графиком можно воспользоваться, когда для испытуемого вещества поглощение пропорционально концентрации в пределах примерно 75—125% от окончательной концентрации, используемой в количественном определении. При этих условиях величина поглощения, найденная при количественном определении, может быть интерполирована с помощью калибровочного графика, а отсюда рассчитывается результат количественного определения. Такие калибровочные графики надо часто проверять и каждый раз готовить заново для нового прибора и новой сери,и реактивов. Если результаты оказываются неопределенными или вызывают сомнения, следует их непосредственно сравнить с результатами, полученными с Международным химическим стандартным образцом.