Наша реклама

Поиск

Спектрофотометрия в видимой и ультрафиолетовой областях спектра

Posted 6/14/2009 в 3:42:26 ДП

Абсорбционная спектрофотометрия — измерение количества поглощенной веществами электромагнитной радиации определенной и узкой волновой области приближенного монохроматического излучения.
Спектральная область, используемая в описанных ниже измерениях, распространяется от коротковолновой ультрафиолетовой до видимой области спектра. Для удобства сравнения эту область можно рассматривать как состоящую из двух частей —ультрафиолетовой (190—380 нм) и видимой (380-780 нм).
Спектрофотометрия в видимой области (ранее обычно использовался термин колориметрия) — измерение количества поглощенного излучения в видимой области спектра, обычно немонохроматического, но ограниченного применением окрашенных или интерференционных фильтров.
Ультрафиолетовые и видимые спектры вещества обычно не отличаются высокой степенью избирательности. Тем не менее они чрезвычайно удобны для количественных определений, а для многих веществ служат дополнительным средством установления подлинности.
Пока еще не достигнуто общее соглашение относительно определения терминов, применяемых в спектрофотометрии. Ниже приведены определения и символы, используемые в описании спектрофотометрических испытаний, применяемых в Международной фармакопее.
Поглощение (А)—десятичный логарифм обратной величины пропускаемости (Г). Как синоним поглощения может использоваться термин «плотность внутреннего пропускания»; ранее применявшиеся описательные термины — «оптическая плотность», «абсорбция» и «экстинкция».
Пропускаемость (Г)—частное от деления интенсивности света, прошедшего через вещество, на интенсивность света, падающего на вещество. Ранее применявшиеся термины — «пропускание» и «коэффициент пропускания».
Поглощаемость (а) — частное от деления поглощения {А) на концентрацию вещества (с), выраженную в граммах на литр, и длину слоя поглощения в сантиметрах (Ь) (а=А1Ьс). С термином «поглощаемость» тесно связаны два других термина: «удельная экстинкция» и «удельный коэффициент поглощения». Термин «удельная экстинкция» (?\°^м)> обычно используемый в фармакопеях, представляет собой частное от деления поглощения (А) на концентрацию вещества (с), выраженную в граммах на 100 мл, и длину слоя поглощения в сантиметрах (Ь)\ следовательно ?'^ = 100. Термин «удельный коэффициент поглощения», предварительно предложенный Комиссией по физико-химическим символам, терминологии и единицам Международного союза теоретической и прикладной химии (ИЮПАК), представляет собой частное от деления поглощения (А) на концентрацию (с) и длину слоя поглощения (I); когда для удельного коэффициента поглощения используется символ aSi, который в единицах системы СИ должен выражаться в квадратных метрах на килограмм, asi= 100 а. Термин «поглощаемость» не следует смешивать с показателем поглощения или коэффициентом экстинкции.
Молярная поглощаемость (е) — частное от деления поглощения (А) на концентрацию вещества (с), выраженную в
молях на литр, и длину слоя поглощения в сантиметрах (Ь). Она также является произведением поглощаемости (а) на молекулярную массу вещества. Термин «молярный коэффициент поглощения» (линейный), рекомендованный Комиссией по физико-химическим символам, терминологии и единицам ИЮПАК, представляет собой частное от деления плотности внутреннего пропускания (поглощения) вещества на концентрацию вещества и длину слоя поглощения и соответственно системе СИ должен выражаться в квадратных метрах на моль. Ранее применявшиеся термины — «показатель молярного поглощения» и «коэффициент молярной экстинкции».
Спектр поглощения — часто выражаемое графически отношение поглощения или любой функции поглощения к длине волны или любой функции длины волны.
Применение абсорбционной спектрофотометрии в видимой и ультрафиолетовой областях спектра для методик количественного определения основано на том факте, что поглощаемость вещества обычно является константой, независимой от интенсивности падающего излучения, длины кюветы и концентрации, вследствие чего концентрация может быть определена фотометрически.
Отклонения от приведенных выше величин могут быть обусловлены физическими, химическими или инструментальными переменными. Отклонения вследствие инструментальной ошибки могут быть вызваны влиянием ширины щели, рассеянием света или полихроматическим излучением. Очевидные ошибки могут также появиться в результате изменения концентрации растворенных молекул вследствие ассоциации между молекулами растворенного вещества, между молекулами растворенного вещества и растворителя, а также вследствие диссоциации или ионизации.